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副溶血性弧菌的測試片檢測方法

方法編號：5044

1 適用范圍：用于各類食品和原料中副溶血弧菌的檢測，以及突發(fā)事件應(yīng)急檢測需要。

2 方法原理：采用一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分，培養(yǎng)15～24小時就可確認(rèn)是否有副溶血弧菌的存在。

3操作方法

3.1樣品處理：取樣品 25 mL（g）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，充分振搖或置均質(zhì)器中制成1:10的樣品勻液。

3．2接種：將測試片置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下。每個樣品接種2片。

3．3 培 養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3．4 結(jié)果判別:呈紫紅色的菌落為副溶血弧菌。多數(shù)非目的菌在測試片上不生長，少數(shù)能生長，如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌，但菌落呈藍(lán)色，明顯區(qū)別于目的菌。對于出現(xiàn)陽性菌落的樣品，用其他方法作進一步的鑒定。

4附加說明

4．1汕頭出入境檢驗檢疫局技術(shù)中心的對比試驗結(jié)果表明，副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性，對純菌的檢測靈敏度達(dá)到8cfu/mL，與SN標(biāo)準(zhǔn)方法符合率達(dá)到90%以上。

4.2注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理 。

4．3出現(xiàn)陽性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進行驗證，沒有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗一次。